Difference between revisions of "Ziemer 2015 Dissertation"
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Revision as of 14:45, 27 October 2015
Ziemer M (2015) Untersuchungen zur AktivitÀt der mitochondrialen PermeabilitÀtstransitionspore in der Cyclophilin-D-Knock-out-Maus (Ppif-/-). Dissertation 1-72. |
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Ziemer M (2015) Dissertation
Abstract: Die mitochondriale PermeabilitĂ€tstransitionspore (PTP) befindet sich in der inneren Mitochondrienmembran und spielt eine wesentliche Rolle im Mechanismus des apoptotischen Zelltodes. Die Ăffnung dieser Pore bewirkt die Freisetzung pro-apoptotischer SignalmolekĂŒle aus dem Intermembranspalt. Das Protein Cyclophilin D (CypD) ist mit der Pore assoziiert und ist Targetprotein fĂŒr den PTP-Inhibitor Cyclosporin A (CsA). Diese Arbeit untersucht mit vergleichenden Experimenten an Wildtyp- und CypD-Knock-out-MĂ€usen die AktivitĂ€t der PTP, die Bedeutung der regulierenden Komponente CypD und die Wirksamkeit von CsA an beiden Maustypen. Messungen des mitochondrialen O2-Verbrauchs zeigten bei der Ko-Maus eine Verschiebung der Ca2+-AbhĂ€ngigkeit der PTP zu höheren Konzentrationen. Eine deutliche Blockade der PTP durch CsA konnte ich respirometrisch nur beim WT darstellen. Eine Wirksamkeit von CsA an der CypD-Ko-Maus ist in der Literatur bisher nicht beschrieben. Mithilfe der Patch-clamp-Technik gelang uns durch Verwendung verschiedener CsA-Konzentrationen eine Charakterisierung des CsA-Effektes auf die Offenwahrscheinlichkeit der Pore sowohl beim WT, als auch bei der Ko-Maus. Die mithilfe der Michaelis-Menten-Kinetik erstellten Dosis-Wirkungs-Kurven zeigten bei der Ko-Maus im Vergleich zum WT eine Verschiebung der normierten Offenwahrscheinlichkeit der Pore um 1,5 GröĂenordnungen zu höheren Konzentrationen. âą Keywords: Mitochondria, Apoptose, Permeability transition pore (PTP), Patch-clamp, Oxygen consumption measurements, Cyclosporin A, Cyclophilin-D-Knock-out-mouse
âą O2k-Network Lab: DE Magdeburg Siemen D
Labels: MiParea: Respiration, mt-Membrane, Genetic knockout;overexpression, Pharmacology;toxicology
Organism: Mouse
Tissue;cell: Liver
Preparation: Isolated mitochondria
Coupling state: OXPHOS
HRR: Oxygraph-2k
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